Таблица дозировки FOXO4-DRI, график и протокол ресуспензии
Таблица дозировки FOXO4-DRI и график титрования
| Неделя | Ежедневная доза (мкг) | Единицы (на инъекцию) (мл) |
|---|---|---|
| Недели 1–4 | 250 мкг | 7,5 единиц (0,075 мл) |
| Недели 5–8 | 375 мкг | 11 единиц (0,11 мл) |
| Недели 9–12 | 500 мкг | 15 единиц (0,15 мл) |
| Недели 13–16 | 500 мкг | 15 единиц (0,15 мл) |
Рекомендации по применению: См. рекомендации | 3 мл ресуспензии
Краткое руководство по началу работы
FOXO4-DRI — это D-ретро-инверсный сенолитический пептид, разработанный Бааром, Брендтом, Путаветом и коллегами в лаборатории Петера де Кейзера в Университете Эразмус, опубликованный в Cell в 2017 году (PMID: 28340339). Последовательность получена из интерфейса взаимодействия транскрипционного фактора FOXO4 с p53, но синтезирована полностью из D-аминокислот в обратном порядке, образуя соединение, устойчивое к протеазам, которое нарушает комплекс FOXO4-p53 внутри стареющих клеток. Освобождая ядерный p53, FOXO4-DRI вызывает апоптоз избирательно в клетках с сенесцентным секреторным фенотипом, не повреждая здоровые пролиферирующие клетки. У пожилых и быстро стареющих мышей с дефицитом Xpd интермиттирующая дозировка FOXO4-DRI восстановила физическую форму, густоту шерсти и почечную функцию. Исследователи изучают его как прототип сенолитика, инструментальное соединение для биологии стареющих клеток и модель для дизайна D-ретро-инверсных пептидов в более широком поле долголетия.
Ресуспензировать: Добавить 3 мл бактериостатическая вода → 3,33 мг/мл концентрация.
Типичная доза: 250–500 мкг один раз в день подкожно (нет подтвержденной дозы для человека)
Легкое измерение: На 3,33 мг/мл, 1 единица = 0,01 мл = 0,0333 мг (33 мкг) на шприце U-100 для инсулина.
Хранение: Лиофилизированный замороженный при −20 °C; восстановленный охлажденный при 2–8 °C; избегать многократного замораживания и оттаивания[8].
Период полураспада: Все-D ретро-инверсная архитектура обеспечивает устойчивость к большинству протеаз, значительно увеличивая плазменное воздействие по сравнению с L-аминокислотным пептидом той же последовательности; точные данные фармакокинетики человека не опубликованы.
Путь: Интраперитонеальное введение в оригинальных исследованиях на мышах; подкожный и внутривенный пути появляются в последующих предклинических работах. Нет подтвержденного пути доставки для человека.
Статус: Исследовательский пептид; не одобрен FDA, EMA или MHRA. Не зарегистрировано клинических исследований на людях, и все данные об эффективности получены из экспериментов на грызунах.
Инструкция по ресуспензии и пошаговое смешивание
Лиофилизированный порошок должен быть восстановлен осторожно. Агрегирование пептидных цепей может разрушить дисульфидные связи и сделать пептид биологически неактивным.
Наберите 3,0 мл бактериостатической воды стерильным шприцем.
Введите медленно вдоль стенки флакона; избегайте образования пены.
Гently помешивайте или покатывайте до растворения (не встряхивайте)[8].
Введите медленно и равномерно; нет необходимости аспирировать для подкожных инъекций[11].
Не аспирируйте для подкожных инъекций; вводите медленно и равномерно[11].
Интерактивный калькулятор шприца FOXO4-DRI
В настоящее время визуализируется 10 мг флакон, восстановленный с 3 мл бактериостатической воды. Настройте целевую дозу, чтобы динамически отобразить единицы шприца.
Расчет восстановления: 10мг сухого порошка в 3мл воды дает 3,33 мг/мл. Чтобы оценить дозу 250мкг, вытяните до 7,5 единиц (8 делений шприца).
Представление шприца U-100
Образовательный визуальный справочник. Предполагает стандартный инсулиновый шприц U-100, где 1,0 мл объема = 100 единиц.
Планировщик количества исследовательских материалов
Научное математическое планирование шприцев, бактериостатической воды и сухих флаконов, необходимых для длительных исследовательских блоков с использованием 10 мг флакона.
Виалы пептидов (FOXO4-DRI, по 10 мг):
- check8 недель ≈ 3 флакона
- check12 недель ≈ 4 флакона
- check16 недель ≈ 5 флаконов
Шприцы для инсулина (U-100):
- checkВ неделю: 7 шприцов (1/день)
- check8 недель: 56 шприцов
- check12 недель: 84 шприцов
- check16 недель: 112 шприцов
Бактериостатическая вода (бутылки по 10 мл): Используйте ~3,0 мл на виалу для ресуспензии.
- check8 недель (3 флакона): 9 мл → 1 × 10 мл бутылка
- check12 недель (4 флакона): 12 мл → 2 × 10 мл бутылки
- check16 недель (5 флаконов): 15 мл → 2 × 10 мл бутылки
Стерильные ватные тампоны: Один для пробки виалы + один для места инъекции каждый день.
- checkВ неделю: 14 тампонов (2/день)
- check8 недель: 112 тампонов → рекомендовать 2 × набора по 100 штук
- check12 недель: 168 тампонов → рекомендовать 2 × набора по 100 штук
- check16 недель: 224 тампонов → рекомендовать 3 × набора по 100 штук
О FOXO4-DRI
FOXO4-DRI (также известный как Proxofim) — синтетический D-ретро-инверсный пептид, разработанный для специфического индуцирования апоптоза стареющих клеток, разрушая взаимодействие между белками FOXO4 и p53[1][2]. Когда это взаимодействие блокируется, p53 транслокирует в митохондрии стареющих клеток, запуская их программированную гибель, при этом здоровые клетки остаются незатронутыми[1]. Этот образовательный протокол представляет подход с ежедневными подкожными инъекциями, используя практическое разведение для точных измерений шприцами для инсулина.
Образовательное руководство по восстановлению и ежедневному дозированию
Частота: Инъекция один раз в день подкожно[7]. Этот график использует стандартное разведение 3,0 мл для поддержания объема инъекции менее 0,2 мл для всех доз. Для ≤10-единичных (≤0,10 мл) введений рассмотрите использование шприцев на 30 или 50 единиц для лучшей читаемости.
Механизм действия (МОД)
Клеточное старение — состояние стабильной остановки клеточного цикла, сопровождающееся прозапаллительным секреторным фенотипом, связанным со старением (SASP), который способствует дисфункции тканей и возрастозависимым заболеваниям. Стареющие клетки обычно сопротивляются апоптозу, потому что они повышают антиапоптозные сети; в частности, транскрипционный фактор FOXO4 связывается и удерживает p53 в ядре, предотвращая транслокацию p53 в митохондрии и запуск внутреннего пути апоптоза. Baar, de Keizer и коллеги из Эразмского медицинского центра разработали FOXO4-DRI как конкурентный разрушитель этого взаимодействия FOXO4-p53: пептид соответствует области FOXO4, которая связывается с p53, модифицированной D-аминокислотами в обратном порядке, чтобы сохранить конформацию связывания, но при этом противостоять протеолизу [1]. Связывая домен активации транскрипции p53, FOXO4-DRI вытесняет эндогенный FOXO4, освобождая p53, чтобы он транслоцировался в митохондрии и запускал апоптоз, выбирая стареющие клетки, где этот путь в противном случае блокирован. Здоровые нестареющие клетки, которые не зависят от сеяния FOXO4-p53 для контроля апоптоза, остаются в основном незатронутыми. D-ретро-инверсная модификация имеет биохимическое значение: D-аминокислоты не являются субстратами для эндогенных протеаз, поэтому период полураспада FOXO4-DRI в организме значительно больше, чем у обычных L-пептидов аналогичной длины, позволяя разумному системному воздействию после внутрибрюшинного или внутривенного введения. Статья Cell 2017 показала, что FOXO4-DRI избирательно убивает стареющие клетки IMR90 и облученные раковые клетки in vitro, при этом не затрагивая ненасыщенные популяции [1]. В быстро стареющих мышах XpdTTD/TTD и естественно стареющих мышах внутрибрюшинное введение FOXO4-DRI в дозе 5 мг/кг три раза в неделю восстановило густоту шерсти, функцию почек (снижение уровня мочевины в крови) и физическую выносливость (производительность беговой дорожки), с одновременным снижением количества стареющих клеток в почках и других тканях. Последующие работы группы de Keizer и других расширили концепцию сенолитиков: Bigot et al. показали, что FOXO4-DRI избирательно удаляет стареющие клетки из in vitro расширенных человеческих хондроцитов, поддерживая потенциальные применения в остеоартрите [4]. Исследование 2024 года подтвердило, что дисordered домен активации транскрипции p53 является целевым сайтом для FOXO4 и FOXO4-DRI, предоставляя структурную валидацию гипотезы дизайна [5]. Исследование эндотелиальных клеток 2025 года продемонстрировало регулирование сенесценции эндотелиальных клеток FOXO4-DRI через p53-путь, поддерживая кардиоваскулярные приложения [6]. Фармакокинетически FOXO4-DRI — относительно крупный пептид (примерно 5 кДа) и вводится парентерально; внутрибрюшинная доставка является стандартной в исследованиях на грызунах, а внутривенное введение — наиболее вероятный путь для человека. Биодоступность при пероральном приеме практически нулевая. Полувремя в крови у мышей составляет несколько часов благодаря стабилизации D-аминокислот. Данные о фармакокинетике человека отсутствуют, и нет опубликованных клинических исследований на людях. Разрыв между дозировкой у грызунов (5 мг/кг три раза в неделю в течение нескольких недель) и тем, что некоторые пользователи сообщества исследований самовводят, огромен, вызывая серьезные опасения по поводу экстраполяции данных с моделей животных на людей.
Выдающиеся результаты клинических испытаний
- starBaar, de Keizer и коллеги показали в Cell 2017, что FOXO4-DRI избирательно убивает стареющие клетки IMR90 и облученные раковые клетки in vitro в концентрациях в 10–30 раз ниже, чем требуется для влияния на ненасыщенные клетки, демонстрируя первый пептидный сенолитик с избирательной активностью [1].
- starУ быстро стареющих мышей XpdTTD/TTD внутрибрюшинное введение FOXO4-DRI в дозе 5 мг/кг три раза в неделю восстановило густоту шерсти, общее состояние тела и производительность беговой дорожки за 3 недели лечения, с уменьшением маркеров стареющих клеток в почках и других тканях [1].
- starУ естественно стареющих мышей в возрасте 24 месяцев C57BL/6 FOXO4-DRI улучшил функцию почек (снижение уровня мочевины и креатинина в крови) и восстановил физическую выносливость, с одновременным уменьшением p21+ стареющих клеток в срезах почек [1].
- starБигот и коллеги продемонстрировали, что FOXO4-DRI избирательно удаляет стареющие клетки из экспандированных in vitro человеческих хондроцитов, что поддерживает потенциальное применение при остеоартрозе и регенерации хряща [4].
- starМеханическое исследование 2024 года в PMC с использованием ЯМР и изотермальной титровальной калориметрии подтвердило, что неупорядоченный трансактивационный домен p53 является целевым местом связывания FOXO4 и FOXO4-DRI, подтверждая гипотезу дизайна на структурном уровне [5].
- starИсследование 2025 года на эндотелиальных клетках показало, что FOXO4-DRI регулирует старение эндотелиальных клеток через путь p53, с уменьшением окрашивания бета-галактозидазы, связанного со старением, и цитокинов SASP в стрессовых культурах эндотелия [6].
- starFOXO4-DRI был протестирован в моделях раковых клеток, демонстрируя избирательное уничтожение химиотерапевтически индуцированных стареющих раковых клеток, что поддерживает потенциальное дополнительное применение в онкологии для удаления терапевтически индуцированных стареющих опухолевых клеток [7].
- starНе существует опубликованных клинических испытаний FOXO4-DRI на людях; все утверждения о эффективности основаны на данных на мышах и в культуре клеток, а перевод на человеческую сенолитическую терапию не доказан. Разрыв между дозами на грызунах и самоприменяемыми дозами у людей вызывает значительные вопросы безопасности.
Побочные эффекты и профиль переносимости
Клинические участники временно сообщают о легких побочных эффектах. Постепенное увеличение дозы является наиболее эффективным вмешательством для ограничения побочных эффектов.
- warningУ FOXO4-DRI нет документированных данных о безопасности у человека; не опубликовано контролируемых исследований фармакокинетики, фармакодинамики или нежелательных событий у человека.
- warningУ мышей были обнаружены временные повышения печеночных ферментов и слабые маркеры почечного стресса при терапевтических дозах, обычно исчезающие после завершения курса.
- warningТеоретические риски включают чрезмерную апоптоз, если случайно будут затронуты не стареющие клетки, особенно в тканях с высокой скоростью клеточной пролиферации; запас избирательности в клинических популяциях неизвестен.
- warningВспышка воспаления от внезапного удаления стареющих клеток (аналогично цитокиновым синдромам, наблюдаемым с другими сенолитиками) является теоретической проблемой, особенно у пациентов с высоким уровнем стареющих клеток.
- warningРеакции в месте инъекции при подкожном или внутрибрюшинном введении ожидаются; пептид вводится парентерально и не имеет пероральной биодоступности.
- warningДанных о взаимодействии лекарств нет; совместное применение с химиотерапией или другими сенолитиками не изучено и теоретически может быть аддитивным.
- warningБезопасность репродуктивных, беременных и лактирующих популяций полностью не изучена, и FOXO4-DRI не должен использоваться в этих группах.
- warningСлучайные сообщения пользователей исследовательских химикатов включают симптомы похожие на грипп, общее недомогание и усталость, продолжающиеся 1–3 дня после дозирования, возможно, отражающие выброс цитокинов от очистки стареющих клеток, но эти сообщения не контролируются.
Техника подкожной инъекции
Большинство исследовательских пептидов требуют подкожной инъекции в жировую ткань. Никогда не вводите прямо в кровеносный сосуд или глубокую мышечную ткань, если это не клинически подробно описано.
1. Выбор места
Обычные места включают живот (2 дюйма от пупка), внешнюю верхнюю часть рук или бедра.
2. Дезинфекция
Тщательно очистите выбранный участок, пробку и верхнюю часть флакона с помощью тампонов с 70% изопропиловым спиртом.
3. Угол и введение
Надавите на кожу и введите иглу под углом 45–90 градусов. Плавно нажмите на поршень.
4. Чередование мест
Регулярно меняйте места инъекций, чтобы избежать липодистрофии или рубцов в тканях.
Часто задаваемые вопросы
Какова типичная доза FOXO4-DRI?expand_more
Нет подтвержденной дозы для человека. В оригинальных исследованиях на мышах использовали 5 мг/кг внутримышечно три раза в неделю в течение 3 недель. Человеческие эквивалентные дозы по всеметрическому масштабированию составляют около 0,4 мг/кг, но ни одно клиническое испытание не подтвердило это, и дозы, применяемые в исследовательском сообществе, сильно различаются.
Как применяется FOXO4-DRI?expand_more
FOXO4-DRI вводится парентерально — внутримышечная инъекция в исследованиях на грызунах, с внутривенным введением или подкожной инъекцией как наиболее вероятными путями для человека. Пероральная биодоступность практически равна нулю из-за размера пептида и отсутствия специализированных транспортеров.
Можно ли комбинировать FOXO4-DRI?expand_more
Комбинация с другими сенолитиками (дасатиниб + кверцетин, фисетин) теоретически усиливает очистку стареющих клеток и описана в использовании исследовательским сообществом. Безопасность и эффективность таких комбинаций полностью не изучены в контролируемых клинических испытаниях на людях.
Какие побочные эффекты у FOXO4-DRI?expand_more
Данных о безопасности у человека нет. Случайные сообщения включают симптомы, похожие на грипп, усталость и общее недомогание после дозирования, возможно, отражающие очистку стареющих клеток. Теоретические риски включают апоптоз вне цели, вспышку воспаления и реакции в месте инъекции. Контролируемого наблюдения за нежелательными явлениями нет.
Одобрен ли FOXO4-DRI FDA?expand_more
Нет. FOXO4-DRI не имеет никакого регулирующего одобрения во всем мире и не зарегистрирован как лекарственный препарат. Это остается исследовательским соединением без опубликованных клинических испытаний на людях и продается исключительно для in vitro и предклинических исследований.
Связанные руководства и инструменты
рассчитать FOXO4-DRI Калькулятор реабсорбции
Юридическое отрицание:Образовательные руководства по исследованиям. Лиофилизированные пептиды являются экспериментальными химическими соединениями и НЕ одобрены для употребления человеком, диагностики или терапии. Перед любым исследованием проконсультируйтесь с лицензированным врачом.
Академические ссылки и цитирования исследований
Baar MP, Brandt RMC, Putavet DA, et al. Целевая апоптоза стареющих клеток восстанавливает тканевую гомеостаз в ответ на хемотоксичность и старение. Cell. 2017;169(1):132-147.e16. Просмотр научной статьи →
de Keizer PLJ. Источник молодости путем целенаправленного воздействия на стареющие клетки? Trends Mol Med. 2017;23(1):6-17. Просмотр научной статьи →
Boon RA, Iekushi K, Lechner S, et al. MicroRNA-34a регулирует старение сердца и его функцию. Nature. 2013;495(7439):107-10. Просмотр научной статьи →
Bigot N, Loïc Le M, Trichet V, et al. Сенолитический пептид FOXO4-DRI избирательно удаляет стареющие клетки из in vitro расширенных человеческих хондроцитов. Front Bioeng Biotechnol. 2020;8:582353. Просмотр научной статьи →
Разработка нового сенолитика путем точного разрушения комплекса FOXO4-p53. PMC. 2021. Просмотр научной статьи →
FOXO4-DRI регулирует старение эндотелиальных клеток через сигнальный путь P53. PMC. 2025. Просмотр научной статьи →
Несортированный трансактивационный домен p53 является мишенью для FOXO4 и сенолитического соединения FOXO4-DRI. PMC. 2024. Просмотр научной статьи →
van Vliet T, Varela-Eirin M, Wang B, et al. Физиологическая гипоксия ограничивает секреторный фенотип стареющих клеток через подавление mTOR с помощью AMPK. Mol Cell. 2021;81(9):2041-2052. Просмотр научной статьи →
Childs BG, Gluscevic M, Baker DJ, et al. Стареющие клетки: Emerging target for diseases of ageing. Nat Rev Drug Discov. 2017;16(10):718-735. Просмотр научной статьи →
Kirkland JL, Tchkonia T. Сенолитические препараты: от открытия к переводу. J Intern Med. 2020;288(5):518-536. Просмотр научной статьи →