sciencea3.org.ru

Как развести пептиды: пошаговое руководство по смешиванию с бактериостатическим водой

Полное руководство по разведению лиофилизированных пептидов — выбор бактериостатической воды, математика разведения, пошаговая процедура, пример BPC-157 и таблица разведения.

verifiedМедицинский обзорМайкл Бре, доктор медицинских наук
eventПоследний обзор
warning

МЕДИЦИНСКОЕ ОТКАЗАТЬСЯ:Информационные исследования только. Лиофилизированные пептиды являются экспериментальными химическими соединениями и НЕ одобрены для употребления человеком, диагностики или терапии. Перед любым исследованием проконсультируйтесь с лицензированным врачом.

Разведение — это процесс растворения лиофилизированного (замороженного) порошка пептида в стерильном водном разбавителе — обычно бактериостатической воды для инъекций (BAC вода), содержащей 0,9% бензилового спирта — чтобы получить инъекционный раствор определенной концентрации. При правильном выполнении разведение сохраняет активность пептида, предотвращает микробное загрязнение и позволяет точно рассчитывать объем дозы. При неправильном выполнении образуется пена, денатурируются чувствительные последовательности или начинается рост бактерий, который повреждает ампулу задолго до окончания 28-дневного периода.

Это руководство является процедурным справочником. Оно описывает необходимые материалы, объясняет, почему BAC вода — правильный разбавитель (вместо стерильного физиологического раствора или обычной воды для инъекций), математику концентрации, пошаговую технику инъекции и преобразования объема в единицы, которые вы будете использовать каждый раз, когда берете дозу. Включает сводную таблицу для распространенных размеров ампул — BPC-157, tirzepatide, semaglutide, retatrutide— и указывает наиболее распространенные ошибки при разведении. Эта процедура должна выполняться только с исследовательскими пептидами; это не медицинский совет.

Список материалов: что вам нужно до открытия ампулы

Разведение — это стерильная процедура. Расположите все материалы перед началом, чтобы ампула оставалась открытой как можно меньше времени.

  • Ампула лиофилизированного пептида — хранится в холодильнике до момента смешивания. Дайте ему нагреться до комнатной температуры (примерно 15 минут на столе) перед открытием — конденсация на холодном стекле может ввести воду в ампулу, когда вы снимете крышку.
  • Бактериостатическая вода для инъекций (BAC вода), USP-класса, 0,9% бензиловый спирт — 10 мл или 30 мл многоразовая ампула. Не стерильная вода для инъекций и не 0,9% хлорид натрия.
  • Шприцы для инсулина U-100 — 0,3 мл (30 единиц) или 0,5 мл (50 единиц), 29–31 G, 8 мм игла. Один шприц на дозу; один отдельный шприц на инъекцию.
  • 3 мл или 5 мл шприц для переноса с иглой 21–23 G — опционально, но удобно для набора BAC воды в больших объемах из закупоренной ампулы.
  • Стерильные тампоны из 70% изопропилового спирта— не менее 6–8 за сеанс.
  • Чистая ровная рабочая поверхность— протерта изопропиловым спиртом, хорошо освещена, без сквозняков и пыли.
  • Стерильный контейнер для острых предметов, одобренный FDAдля утилизации.
  • Перманентный маркер и этикеткидля обозначения даты реосмоляции и концентрации на ампуле.
  • Перчатки без порошка— опционально, но рекомендуется.

Не повторно использовать иглы между заборами. Каждый проход через пробку вырезает микроскопический фрагмент резиновой пробки в ампулу и увеличивает вероятность загрязнения [1][2].

Почему бактериостатическая вода, а не стерильный физиологический раствор?

Три разбавителя обычно рассматриваются для реосмоляции пептидов. Только один подходит для многодозового использования.

Бактериостатическая вода для инъекций (BAC вода) — правильно

BAC-вода высокой чистоты — стерильная вода, содержащая 0,9% бензилового спиртав качестве бактериостатического консерванта. Бензиловый спирт подавляет рост обычных загрязнителей, таких как Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus aureus, E. coli и Pseudomonas, позволяя безопасно повторно вводить многодозовую ампулу в течение 28 дней после первого прокола [3][4]. Это стандартный растворитель для любой ампулы пептида, которую будут забирать более одного раза. Убедитесь, что на этикетке указано 0,9% бензилового спирта; более низкая концентрация или «безконсервантная» бактериостатическая вода не эквивалентна.

Стерильная вода для инъекций (SWFI) — неправильно для многоразового использования

Обычная SWFI не содержит консервантов. После прокола ее нельзя безопасно повторно использовать через несколько часов. Она подходит только для одноразовых ампул, приготовленных и введенных в течение нескольких минут. Для исследовательских протоколов пептидов, где одна ампула 5 мг или 10 мг будет использоваться в течение 4–6 недель, SWFI — неправильный выбор.

0.9% хлорид натрия (физиологический раствор) — неправильно для большинства пептидов

Солевой раствор гипертоничен по отношению к многим пептидным растворам, не имеет антибактериального консерванта в стандартных препаратах и может изменять pH и ионную среду определенных последовательностей. Он иногда указывается для одноразовых внутривенных препаратов под контролем аптеки больницы, но не является универсальным разбавителем для пептидов.

Растворы уксусной кислоты — только для специального применения

Небольшое количество пептидов (несколько гидрофобных гормонов роста, некоторые биорегуляторы) трудно растворяются в BAC-воде и реосмоляются в 0,6% уксусной кислоте или 1% воде, кислотифицированной бензиловым спиртом. Следуйте сертификату анализа поставщика — не переключайтесь на кислотифицированный разбавитель, если это не указано явно, потому что более низкий pH ускорит деградацию пептидов, чувствительных к pH [5].

Расчет разведения: содержание пептида в ампуле (мг) ÷ объем воды (мл) = концентрация

Концентрация реосмоляционного раствора определяется исключительно тем, сколько воды вы добавляете в ампулу. Формула проста, но стоит запомнить:

Концентрация (мг/мл) = Масса пептида в ампуле (мг) ÷ Объем BAC-воды, добавленной (мл)

Пример расчета — BPC-157

Обычно BPC-157 ампула содержит 5 мг. Реосмоляция с 2 мл BAC-воды даст:

5 мг ÷ 2 мл = 2,5 мг/мл

Если протокол требует 250 мкг (0,25 мг) на дозу, объем для забора составит 0,25 мг ÷ 2,5 мг/мл = 0,1 мл, что составляет 10 единиц на шприце U-100.

Пример расчета — Tirzepatide

Ампула 10 мг tirzepatide, реосмоляция с 2 мл BAC-воды даст:

10 мг ÷ 2 мл = 5 мг/мл

Доза титрования 2,5 мг: 2,5 мг ÷ 5 мг/мл = 0,5 мл = 50 единиц. Доза 5 мг: 1,0 мл = 100 единиц. Ампула 10 мг при этой концентрации обеспечивает четыре дозы 2,5 мг или две дозы 5 мг.

Общие предустановленные разведения

Размер ампулы (мг)BAC-вода (мл)Концентрация (мг/мл)Типичное применение
21,02,0Мелкие пептиды, протоколы с низкой дозой
51,05,0BPC-157, TB-500 концентрированный
52,02,5BPC-157, TB-500 стандартный
52,52,0BPC-157 разбавленный для разделения дозы
101,010,0Концентрированная дозировка GLP-1
102,05,0Стандартный tirzepatide, высокая доза BPC-157
102,54,0Титрование семаглютида
153,05,0Стандартный Retatrutide
303,010,0Многонедельное поставление tirzepatide

Выберите разбавление, которое помещает вашу целевую дозу между 10 и 50 единицами на шприце U-100. Дозы меньше 5 единиц трудно измерить точно; дозы больше 50 единиц бесполезны и требуют нескольких заборов.

Пошаговая процедура разведения

Позвольте как ампуле пептида, так и ампуле BAC-воды оставаться при комнатной температуре в течение 10–15 минут перед началом. Мыть руки и надевать перчатки, если используете.

  1. Подготовьте рабочую поверхность.Протрите 70% изопропиловым спиртом. Расположите все материалы в пределах досягаемости.
  2. Снимите пластиковые крышкис ампулы пептида и ампулы BAC-воды. Это открывает резиновые пробки. Не снимайте металлическую заклепку под ними.
  3. Протрите обе пробкисвежим спиртовым тампоном. Оставьте высыхать на 5–10 секунд — влажный спирт может быть втянут в ампулу.
  4. Наберите бактериостатическую воду.Используя шприц U-100 (или 3 мл шприц для больших объемов), потяните поршень до нужного объема воды — сначала наберите немного воздуха, введите его в ампулу BAC-воды, чтобы выровнять давление, затем наберите правильный объем. Похлопайте по шприцу, чтобы выпустить пузырьки, затем вдавите их обратно в ампулу и снова наберите.
  5. Введите воду в ампулу пептида.Вставьте иглу в ампулу пептида под углом, чтобы кончик указывал на внутреннюю стенку стекла. Медленно влейте BAC-воду вдоль стенки— не распыляйте ее напрямую на порошок. Прямой удар может вызвать пенообразование пептида, денатурацию чувствительных последовательностей и захват микробubbles, которые мешают последующим заборам.
  6. Выровняйте давление.Перед извлечением пустого шприца слегка потяните поршень, чтобы удалить вакуум из ампулы. Это предотвратит возвращение резиновой пробки к вам.
  7. Позвольте пептиду раствориться.Поставьте ампулу вертикально. Лиофилизированный кусочек растворится за 30–90 секунд — иногда быстрее. Не встряхивайте. Если после 1–2 минут остаются небольшие видимые частицы, аккуратно покрутите ампулу по горизонтали или медленно вращайте между ладонями. Полностью реосмоляционный раствор должен быть прозрачным и бесцветным.
  8. Надпишите ампулу.Напишите дату реосмоляции, концентрацию в мг/мл и срок годности 28 дней на боку ампулы перманентным маркером. Некоторые пользователи добавляют небольшую этикетку вместо написания на стекле напрямую.
  9. Храните немедленнопри 2–8 °C. Не замораживайте реосмоляционный раствор. Ознакомьтесь с нашим руководством по хранению пептидовдля деталей срока хранения конкретных соединений.

Реосмоляция должна занять менее пяти минут, как только материалы будут разложены. Практикуйтесь в последовательности с чистой водой перед открытием дорогого пептида.

Объем в единицы: перевод мг, мкг и мл для шприцев U-100

Каждая доза рассчитывается в три этапа: преобразуйте массу дозы в мл, используя концентрацию, затем преобразуйте мл в единицы инсулина. Стандартный коэффициент преобразования:

1 мл на шприце U-100 = 100 единиц, поэтому 0,01 мл = 1 единица.

Единая формула:

Единицы = (Доза в мг ÷ Концентрация в мг/мл) × 100

Или, эквивалентно, если ваша доза в микрограммах:

Единицы = (Доза в мкг ÷ Концентрация в мкг/мл) × 100

Пример расчета — 500 мкг BPC-157 из ампулы 5 мг/мл

Доза = 500 мкг = 0,5 мг. Концентрация = 5 мг/мл. Объем = 0,5 ÷ 5 = 0,1 мл = 10 единицна шприце U-100.

Пример расчета — 2,5 мг tirzepatide из ампулы 5 мг/мл

Доза = 2,5 мг. Концентрация = 5 мг/мл. Объем = 2,5 ÷ 5 = 0,5 мл = 50 единиц.

Пример расчета — 250 мкг ipamorelin из ампулы 2 мг/мл

Доза = 250 мкг = 0,25 мг. Концентрация = 2 мг/мл. Объем = 0,25 ÷ 2 = 0,125 мл = 12,5 единиц. На шприце с половинными единицами это считается полумаркой выше 12. На шприце с целыми единицами округлите до 12 или 13 единиц в зависимости от допустимости протокола.

Наша специализированная инструкция по измерению шприцаподробнее объясняет правильное чтение цилиндра, выбор правильного размера шприца и избегание распространенной ошибки — чтение с другого конца поршня.

Ошибки и проблемы, которые следует избегать

Эти проблемы наиболее часто снижают целостность пептида или приводят к потере ампулы.

Пенообразование и агрессивное перемешивание

Пептиды — поверхностно-активные вещества — накапливаются на границе воздух-вода и могут денатурироваться при образовании пены. Всегда вводите BAC-воду вдоль стенки ампулы. Не встряхивайте. Не ультразвуковой. Если ампула пенилась, оставьте ее на 10 минут, чтобы пена уменьшилась, прежде чем делать первый забор. Агрегация, образованная во время пенообразования, частично необратима и может снизить активность [5][6].

Циклы замораживания и оттаивания

Реосмоляционный раствор пептида никогда не должен замораживаться. Образование льда концентрирует пептид в незамерзших жидкостных карманах при высокой локальной концентрации и физически разрушает гидратационную оболочку, производя агрегацию при оттаивании. Даже одно замораживание и оттаивание может снизить активность чувствительных пептидов на 20% или более [6][7]. Храните при 2–8 °C; если вам нужно долгосрочное хранение, держите лиофилизированную ампулу замороженной и реосмоляйте только то, что будет использовано в течение 28 дней.

Высверливание пробки и загрязнение при повторном введении

Каждый проход через резиновую пробку имеет небольшую вероятность попадания фрагментов резины в раствор. Повторные проколы также создают микроканалы, которые могут пропускать бактерии. Ограничьте число проколов минимально необходимым, всегда используйте новую иглу и всегда протирайте пробку перед каждым проколом [1][2].

Неправильная последовательность игл

Некоторые пользователи отсасывают воду толстой иглой 21 G, а затем меняют ее на инсулиновую иглу 29–31 G для самой инъекции. Это нормально, но только если делать это осторожно — каждая смена иглы — это еще один прокол пробки. Самый чистый процесс использования одной инсулиновой шприца для набора как BAC воды, так и раствора пептида.

Разведение в неправильной концентрации

Если ваш протокол предполагает дозы в 0.5 мл, но вы развели его в высокой концентрации, так что каждая доза составляет 0.05 мл, вы будете испытывать трудности с точным измерением. Выберите разведение, которое делает вашу типичную дозу между 10 и 50 единицами на шприце U-100.

Пропуск наклейки с датой

Робустный пентадекапептид, изначально выделенный из желудочного сока. Устойчив к pH 2–10 и устойчив к желудочным ферментам. Хорошо восстанавливается в BAC воде при концентрациях до 10 мг/мл без обнаружения агрегации в исследованиях животных-формуляций [8][9]. Типичное восстановление: 5 мг флакона в 2 мл BAC воды → 2.5 мг/мл.

Особенности конкретных пептидов

BPC-157

Долгие жирнокислотно-ацилированные инкретины. Хорошо восстанавливается в BAC воде; концентрированные растворы (>10 мг/мл) могут немного помутнеть из-за склонности ацильной цепи к самой себе — аккуратно помешивайте и подогревайте до комнатной температуры, чтобы очистить. Типичное восстановление: 10 мг в 2 мл BAC воды → 5 мг/мл.

Tirzepatide и semaglutide

Тройной агонист с C20 жирнокислотной цепью, похожей на tirzepatide. Применяются те же принципы обработки. Типичное восстановление: 15 мг в 3 мл BAC воды → 5 мг/мл, поддерживающее еженедельное дозирование от 2 мг до 12 мг по всему диапазону титрования.

Retatrutide

Маленькие синтетические пептиды, которые быстро растворяются. Часто смешиваются в одном флаконе. Типичное восстановление: 5 мг каждого в 2 мл BAC воды → 2.5 мг/мл каждого пептида для стандартной дозы 200 мкг + 200 мкг перед сном в 8 единиц.

Ipamorelin, CJC-1295 (без DAC)

17-аминокислотный пептид; хорошо восстанавливается в BAC воде. Чувствителен к повторному замораживанию и оттаиванию — храните восстановленный флакон в холодильнике и используйте в течение 28 дней.

TB-500 (фрагмент тимосина бета-4)

16-аминокислотный митохондриально-кодируемый пептид. Хорошо восстанавливается в BAC воде, но необычайно чувствителен к повторному замораживанию и оттаиванию лиофилизированного исходного материала; отправляйте и храните в холодной цепи и минимизируйте циклы температур [10]. Типичное восстановление: 10 мг в 2 мл BAC воды → 5 мг/мл.

MOTS-c

После каждой инъекции закройте иглу (если используется шприц с защитным колпачком) или сразу поместите незакрытый шприц в одобрительный FDA контейнер для игл. Не закрывайте вручную — это наиболее частая причина случайных уколов. Контейнеры для игл никогда не заполняйте более чем на две трети и утилизируйте их через лицензированный сервис медицинских отходов или программу сдачи игл в местной аптеке.

Утилизация и обращение после использования

Истекший флакон — за пределами 28-дневного окна после восстановления, или показывающий любую помутненность, изменение цвета, частицы или разделение — должен быть уничтожен. Не «доливайте» истекший флакон дополнительной BAC водой; концентрация бензилового спирта фиксирована на первоначальном разведении, и добавление большего количества воды снижает ее ниже бактериостатического порога.

Если вы заметите какие-либо из следующих признаков в любой момент, уничтожьте флакон: видимые частицы, плавающие в растворе, постоянная помутненность после нагрева до комнатной температуры и аккуратного помешивания, желтоватое или коричневое окрашивание, разделение на слои, похожие на масло и вода, или повреждение пробки. Это признаки либо микробного загрязнения, либо агрегации пептида, ни одно из которых нельзя обратить вспять [5][7].

28-дневный срок хранения восстановленного флакона BAC-воды не является заявлением производителя о стабильности самого пептида — это продолжительность, в течение которой 0.9% бензилового спирта был показан, чтобы подавлять рост микроорганизмов в многодозовых флаконах с повторными проколами [3][4]. Многие пептиды остаются химически активными значительно дольше 28 дней в растворе, но бактериостатический консервант является ограничивающим фактором для безопасного введения. Некоторые рабочие процессы разделяют лиофилизованный флакон пополам перед восстановлением и хранят одну половину в замороженном виде, затем восстанавливают вторую половину позже — это сохраняет активность без нарушения бактериостатического окна.

Ожидания стерильности и 28-дневный период

Каждый раз, когда вы возвращаетесь в флакон, выполните быструю трехэтапную проверку. Сначала осмотрите раствор против темного фонового — он должен быть прозрачным и бесцветным без видимых частиц или волокон. Второй, проверьте герметичность пробки и этикетку — дата должна все еще находиться в пределах 28-дневного окна, пробка целая, и указанная концентрация читаема. Третий, наберите небольшой тестовый объем, чтобы убедиться, что раствор свободно течет без необычного сопротивления или видимых микробubbles, текущих с иглы. Эти три проверки занимают менее десяти секунд и позволяют выявить наиболее распространенные проблемы качества до того, как они достигнут места инъекции.

Контроль качества перед каждым забором

Сколько бактериостатической воды я должен добавить в флакон с 5 мг BPC-157?

Часто задаваемые вопросы

expand_moreМожно ли использовать дистиллированную воду или воду из-под крана для восстановления пептидов?

Большинство протоколов используют 2 мл BAC воды, образуя концентрацию 2.5 мг/мл. Затем доза 250 мкг равна 0.1 мл или 10 единицам на инсулиновом шприце U-100. Если вы предпочитаете большие объемы (легче измерить на маленьких шприцах), используйте 2.5 мл воды для концентрации 2.0 мг/мл, где 250 мкг = 12.5 единиц.

expand_moreПочему я не должен встряхивать флакон с пептидом?

Нет. Дистиллированная вода и вода из-под крана не стерильны, не имеют буферного pH и содержат минеральные ионы, которые могут вызывать агрегацию. Только стерильная бактериостатическая вода для инъекций USP-класса (0.9% бензилового спирта) подходит для многодозового восстановления пептидов. Для одноразового клинического восстановления можно использовать стерильную воду для инъекций [3][4].

expand_moreКак долго сохраняет свою активность восстановленный пептид?

Встряска создает пены на границе воздух-вода, где пептиды денатурируют и агрегируют. То же механическое напряжение также разрушает слабые водородные связи внутри молекул, ускоряя потерю биологической активности. Всегда аккуратно помешивайте или вращайте флакон между ладонями — никогда не встряхивайте [5][6].

expand_moreНужно ли встряхивать или аккуратно помешивать после восстановления?

Большинство восстановленных пептидов, хранимых при 2–8 °C в бактериостатической воде, остаются активными около 28 дней, соответствующих антибактериальному окну BAC воды. Некоторые пептиды, такие как MOTS-c, деградируют быстрее (14–21 дней). Чувствительные последовательности следует разделить на более мелкие флаконы, если вы не можете использовать объем в течение этого периода.

expand_moreМожно ли смешивать два пептида в одном флаконе?

Аккуратно помешивайте горизонтальным кругом или медленно вращайте флакон между ладонями. Лиофилизированный кекс обычно растворяется в течение 30–90 секунд при комнатной температуре без какого-либо воздействия. Если остались мелкие частицы, дайте ему еще 2–3 минуты перед помешиванием. Встряска никогда не подходит.

expand_moreЧто происходит, если восстановленный пептид случайно заморожен?

Да, если они фармакологически совместимы — общие комбинации включают CJC-1295 + ipamorelin и BPC-157 + TB-500. Смешайте лиофилизированные порошки перед добавлением BAC воды или добавьте оба в один пустой стерильный флакон. Убедитесь, что оба стабильны при одном pH и что совместная концентрация находится в пределах растворимости.

expand_moreПочему флаконы с пептидами иногда выглядят пустыми?

Уничтожьте его. Образование льда концентрирует пептид на фронте замерзания и нарушает гидратационную оболочку, вызывая необратимую агрегацию. Даже один цикл замораживания и оттаивания может снизить активность на 20% или больше для чувствительных пептидов [6][7]. Всегда храните в холодильнике; никогда не замораживайте восстановленный раствор.

expand_moreЛиофилизированные кексы пептидов кажутся обманчиво маленькими — флакон с 5 мг может выглядеть как тонкая пленка, прилипшая ко дну или стенкам стекла. Это нормально. После добавления BAC воды аккуратно помешивайте; видимый кекс растворяется в полностью прозрачном растворе в течение 30–90 секунд.

Примените это руководство к реальным протоколам. На каждой связанной странице есть живой калькулятор восстановления и график титрования.

Ссылки и цитирования

  1. [1]

    Общая глава USP <797> Фармацевтическая компоновка — Стерильные препараты (редакция 2023 г.).Показать исходный код →

  2. [2]

    Рекомендации ASHP по компоновке стерильных препаратов (2014, Am J Health Syst Pharm).Показать исходный код →

  3. [3]

    FDA — Бактериостатический водный раствор для инъекций USP, этикетка продукта (Hospira/Pfizer).Показать исходный код →

  4. [4]

    Монография USP-NF: Бактериостатический водный раствор для инъекций. Американский фармакопейный комитет.Показать исходный код →

  5. [5]

    Manning MC, Chou DK, Murphy BM, et al. (2010) Pharm Res 27(4):544-575 — 'Устойчивость белковых лекарственных средств: обновление.'Показать исходный код →

  6. [6]

    Wang W (2000) Int J Pharm 203(1-2):1-60 — 'Лиофилизация и разработка твердых белковых лекарственных средств.'Показать исходный код →

  7. [7]

    Nugrahadi PP, Hinrichs WLJ, Frijlink HW, et al. (2023) Pharmaceutics 15(3):935 — 'Проектирование стратегий формулирования для повышения устойчивости терапевтических пептидов в водных растворах: обзор.'Показать исходный код →

  8. [8]

    Sikiric P, Seiwerth S, Rucman R, et al. (2019) Inflammopharmacology 27:217-249 — 'BPC 157: Цитопротекция и справляться со стрессом.'Показать исходный код →

  9. [9]

    Sikiric P, Drmic D, Sever M, et al. (2020) Curr Pharm Des 26(25):2901-2918 — 'Заживление свищей: многосторонние полезные эффекты BPC 157.'Показать исходный код →

  10. [10]

    Reynolds JC, Lai RW, Woodhead JST, et al. (2021) Nat Commun 12:470 — 'MOTS-c — регулятор возрастной физической деградации, индуцированный физическими упражнениями.'Показать исходный код →

  11. [11]

    Wang W (1999) Int J Pharm 185(2):129-188 — 'Неустойчивость, стабилизация и формулировка жидких белковых лекарственных средств.'Показать исходный код →

  12. [12]

    Akers MJ (2002) J Pharm Sci 91(11):2283-2300 — 'Взаимодействие консервантов с лекарственными средствами в парентеральных формулировках.'Показать исходный код →

  13. [13]

    Frokjaer S, Otzen DE (2005) Nat Rev Drug Discov 4(4):298-306 — 'Устойчивость белковых лекарственных средств: задача формулирования.'Показать исходный код →

  14. [14]

    Руководство FDA для промышленности — Стерильные лекарственные средства, производимые асептическим процессом.Показать исходный код →

  15. [15]

    Bhatnagar BS, Bogner RH, Pikal MJ (2007) Pharm Dev Technol 12(5):505-523 — 'Устойчивость белков при замораживании.'Показать исходный код →