Таблица дозировки B7-33, график и протокол ресуспензии
Таблица дозировки B7-33 и график титрования
| Фаза | Доза на инъекцию | Единицы (на инъекцию) |
|---|---|---|
| Низкий исследовательский ориентир (~250 мкг/инъекция) | 250 мкг | 10 единиц (0.10 мл) |
| Средний исследовательский ориентир (~500 мкг/инъекция) | 500 мкг | 20 единиц (0.20 мл) |
| Верхний иллюстративный ориентир (~1000 мкг/инъекция) | 1000 мкг (1 мг) | 40 единиц (0.40 мл) |
Рекомендации по применению: Следуйте рекомендациям | 2 мл ресуспензии
Краткое руководство
B7-33 — это 27-аминокислотный одноцепочечный миметик релаксина-2 и первый функционально селективный ('биасированный') агонист рецептора релаксина RXFP1. Получен из B-цепи (B7–B33) H2 релаксина с заменой цистеинов на серин, он предпочтительно стимулирует антифиброзную сигнализацию pERK1/2 и MMP-2 — частично через RXFP1–AT2R гетеродимеры — в то время как в основном избегает вазоактивных и пролиферативных эффектов релаксина (PMID 30155023). В моделях мышей с кардиальной, легочной и сосудистой фиброзом он соответствовал противоскальному действию релаксина, и после инфаркта миокарда при 0.25 мг/кг, примерно вдвое уменьшил размер инфаркта (PMID 32295457). Он применяется парентерально в исследованиях, обычно путем инфузии осмотического минипомпы, поскольку его in vitro период полураспада в сыворотке составляет всего около 6 минут (PMID 37047588). B7-33 никогда не тестировалось на людях, не имеет подтвержденной дозы для человека и не одобрено FDA или EMA — продается только для лабораторных исследований. Подкожные данные по ресуспензии здесь являются образовательной справкой, а не медицинским советом.
Ресуспензировать: Добавьте 2 мл бактериостатической воды → 2.5 мг/мл концентрация.
Типовая доза: Нет подтвержденной дозы для человека; ~0,25 мг/кг/день внутримышечно (предклинические исследования)
Легкое измерение: На 2,5 мг/мл, 1 единица = 0,01 мл = 0,0250мг (25мкг)на шприце для инсулина U-100.
Хранение: Лиофилизированный порошок хранится замороженным при -20 °C или ниже, защищенный от света и влаги. Поскольку B7-33 — это не защищенный линейный пептид, который быстро деградирует в растворе, разведенный материал должен храниться в холодильнике при 2–8 °C и использоваться в течение примерно 1–2 недель, или расфасовываться и замораживаться при -20 °C, чтобы минимизировать циклы замораживания и оттаивания.
Период полураспада: ~6 минут in vitro (сыворотка); in vivo даже короче, поэтому в исследованиях используют непрерывную инфузию с осмотическим минипумпом. Липидированная аналог (L-B7-33) достигает ~60 минут in vitro.
Путь введения: Парентеральное в исследовании — подкожное, внутрибрюшинное или назальное, часто посредством непрерывной инфузии. Не пероральное, никогда не применяется у людей; здесь подкожная реинфузия — только для измерения.
Статус: Не одобрено FDA или EMA; нет клинических исследований на людях. Только для исследовательского/образовательного использования (CAS 1818415-56-3). Эта страница не является медицинскими рекомендациями.
Инструкция по ресуспензии и пошаговое смешивание
Лиофилизированный порошок должен быть правильно реинфузирован. Вибрация пептидных цепей может разрушить дисульфидные связи и сделать пептид биологически неактивным.
Наберите 2,0 мл бактерицидной воды в стерильный шприц (это даст раствор 2,5 мг/мл из флакона 5 мг, т.е. 25 мкг на единицу шприца для инсулина).
Медленно введите воду вдоль внутренней стенки флакона; не распыляйте ее напрямую на порошок, никогда не взбалтывайте — вибрация может разрушить этот хрупкий линейный пептид.
Аккуратно помешивайте и оставьте флакон стоять до тех пор, пока раствор не станет полностью прозрачным; если частицы или помутнение сохраняются, откажитесь от инъекции.
Храните в холодильнике при 2–8 °C и наберите единицы для выбранной вами исследовательской ссылки (250 мкг ≈ 10 единиц, 500 мкг ≈ 20 единиц, 1000 мкг ≈ 40 единиц на шприце U-100); для более длительного хранения расфасуйте и заморозьте при -20 °C.
Образовательное примечание: у B7-33 очень короткий период полураспада, и в исследованиях его обычно вводили непрерывно через осмотический минипумп, а не болюсно. Для модели подкожного введения здесь обработайте место, введите медленно и меняйте места — осознавая, что болюсная дозировка не воспроизводит постоянное воздействие, используемое в исходных исследованиях.
Интерактивный калькулятор шприца B7-33
В настоящее время визуализируется 5 мгфлакон, реинфузированный 2мл бактерицидной воды. Настройте целевую дозу, чтобы динамически отображать единицы шприца.
Расчет реинфузии: 5мг сухого порошка в 2мл воды дает 2,50 мг/мл. Чтобы оценить дозу 250мкг, наберите 10,0 единиц (10делений шприца).
Представление шприца U-100
Образовательный визуальный справочник. Предполагает стандартный шприц U-100 для инсулина, где 1,0 мл объема = 100 единиц.
Планировщик количества исследовательских материалов
Научное математическое планирование шприцев, бактерицидной воды и сухих флаконов, необходимых для длительных исследовательских блоков с использованием 5 мгфлакона.
Виалы пептидов (B7-33, по 5 мг):
- check8 недель при 250 мкг дважды в день (0,5 мг/день) ≈ 28 мг ≈ 6 флаконов
- check12 недель при 500 мкг дважды в день (1 мг/день) ≈ 84 мг ≈ 17 флаконов
- check16 недель при 1000 мкг дважды в день (2 мг/день) ≈ 224 мг ≈ 45 флаконов — высокое количество отражает короткий период полураспада и почему исследования проводятся посредством инфузии, а не болюсного введения
Шприцы для инсулина (U-100):
- checkДвухразовое применение: 14 шприцов в неделю
- check8 недель ≈ 112 шприцов; 12 недель ≈ 168 шприцов
- check16 недель ≈ 224 шприцов; держите запасы на случай ошибок при работе с хрупким пептидом
Бактериостатическая вода (бутылки по 30 мл): Используйте 2 мл на виалу с 5 мг для ресуспензии.
- check8 недель (~6 флаконов) ≈ 12 мл ≈ 1 бутылка
- check12 недель (~17 флаконов) ≈ 34 мл ≈ 2 бутылки
- check16 недель (~45 флаконов) ≈ 90 мл ≈ 3 бутылки
Стерильные ватные тампоны:
- check1-2 салфетки на дозу (верхняя часть флакона + место инъекции), 14 доз в неделю
- check8 недель ≈ 110-220 салфеток; 12 недель ≈ 170-340 салфеток
- check16 недель ≈ 220-450 салфеток; держите дополнительные для повторной обработки многоразовых флаконов
О B7-33
B7-33 — это одноцепочечный миметик релаксина-2 и первый известный функционально избирательный ("biased") агонист рецептора релаксина RXFP1. Он воспроизводит антифиброзную сигнализацию релаксина (pERK1/2 и индукцию MMP), в то время как в основном избегает кАМП-связанных сосудистых и пролиферативных эффектов полного гормона [1]. Его изучали только в клетках и животных; нет подтвержденной дозы B7-33 для человека, и соединение никогда не тестировалось в клиническом испытании.\n\nВ опубликованных работах пептид вводится парентерально — подкожно, внутрибрюшинно или назально — и часто через имплантированный осмотический минипумп вместо болюсной инъекции, потому что его период полураспада в vitro составляет всего около 6 минут [3][5]. Основной предклинический показатель составляет примерно 0,25 мг/кг/день; после инфаркта миокарда одна из исследований дозировала 0,25 мг/кг подкожно при реперфузии и затем дважды в день [3][4]. Подкожные числа реинфузии ниже — образовательная точка измерения, основанная на этом дважды в день исследовательском режиме, а не рекомендуемый протокол для человека.\n\nЭтот руководство моделирует 5-мг флакон, реинфузированный 2,0 мл бактерицидной воды (2,5 мг/мл), так что дозы попадают чисто на шприце U-100 для инсулина: 250 мкг ≈ 10 единиц, 500 мкг ≈ 20 единиц, и 1000 мкг ≈ 40 единиц. Эти иллюстративные количества на инъекцию предоставлены только для того, чтобы математика была конкретной; они не получены из какого-либо исследования дозирования для человека.\n\nЧастота: Два раза в день подкожно в этом образовательном моделировании, отражающем короткий период полураспада и двухразовый режим, использованный в исследовании инфаркта миокарда [3]. B7-33 не одобрен FDA или EMA и представлен здесь только для исследовательских и образовательных целей.
Механизм действия (MOA)
B7-33 — это одноцепочечный пептид, соответствующий региону B7–B33 человеческого B-цепи релаксина H2 (около 27 остатков, ~2,986 Да, CAS 1818415-56-3). В природном релаксине для полной активности необходимы две дисульфидно связанные цепи; конструкция B7-33 полностью удаляет A-цепь и заменяет два цистеина B-цепи на серин, образуя линейный неагрегирующий пептид, который значительно проще и дешевле производить по сравнению с рекомбинантным серелаксином [1][6].
Выдающиеся результаты клинических испытаний
- starНе проводилось клинических испытаний B7-33 у людей; все данные об эффективности получены на предклиническом уровне (клетки и грызуны), поэтому ни один из результатов ниже не подтверждает эффективность, безопасность или дозировку у человека.
- starХоссайн и коллеги (Chemical Science, 2016) впервые сообщили о B7-33 как единственном известном функционально селективном агонисте RXFP1, показав, что он слабо активирует цАМФ, но мощно фосфорилирует ERK1/2 в клетках, экспрессирующих RXFP1 в естественных условиях, предотвращает или обратно приводит к фиброзу в трех моделях заболеваний сердца и легких у грызунов с эффективностью, сравнимой с H2 релаксином, и — в отличие от релаксина — не стимулирует рост опухолей предстательной железы in vivo [1].
- starВ том же исследовании антифиброзный механизм был связан с гетеродимерами RXFP1-рецептора типа 2 ангиотензина II (AT2R), которые стимулируют pERK1/2 и экспрессию матричной металлопротеазы-2, связывая смещённый сигнал напрямую с разрушением коллагена [1].
- starМаршалл и коллеги (European Journal of Pharmacology, 2017) показали у самцов крыс Вистар, что B7-33 воспроизводит быстрые вазопротекторные действия серелаксина, избирательно усиливая расслабление, зависящее от брадикинина, эндотелиальное в мезентериальных артериях за счет увеличения гиперполяризации, производимой эндотелием — поддерживая его как более дешевую альтернативу двухцепочечному гормону [2].
- starДевараконда и коллеги (Journal of the American Heart Association, 2020) ввели мышам B7-33 в дозе 0,25 мг/кг подкожно в начале реперфузии и продолжали дважды в день; B7-33 примерно вдвое уменьшил размер инфаркта (около 22% против 45% в контроле) и сохранил функцию сердца, уменьшая гибель кардиомиоцитов и стресс эндоплазматического ретикулума [3].
- starАлам и коллеги (Biomedicine & Pharmacotherapy, 2023) лечили кардиомиопатию, вызванную изопротеренолом, у мышей B7-33 в дозе 0,25 мг/кг в день подкожно (эквивалент, скорректированный по молекулярной массе, для релаксина 0,5 мг/кг в день) с 7 по 14 день; B7-33 равнялся релаксину в уменьшении левожелудочковой фиброзы, воспаления и гипертрофии и восстановлении плотности сосудов, и уменьшал фиброз более полно, чем ингибитор АПФ периндоприл (1 мг/кг в день) [4].
- starПравин и коллеги (International Journal of Molecular Sciences, 2023) определили in vitro время полураспада B7-33 около 6 минут и продемонстрировали, что липидированный производный (L-B7-33) увеличил его примерно в десять раз до ~60 минут, сохранив активность RXFP1 — работа, явно framed как предклиническая оптимизация перед любыми будущими исследованиями PK/PD in vivo [5].
- starОбзоры одноцепочечных агонистов релаксина позиционируют B7-33 как доказательство концепции смещённого лиганда RXFP1, терапевтическая трансляция которого всё ещё зависит от преодоления его короткого времени полураспада и создания данных о фармакокинетике in vivo и безопасности у человека, которых пока нет [6][7].
Побочные эффекты и профиль переносимости
Клинические участники временно сообщают о слабых побочных эффектах. Постепенное увеличение дозы является наиболее эффективным вмешательством для ограничения побочных эффектов.
- warningБезопасность у человека неизвестна: B7-33 никогда не вводился людям, поэтому нет клинических данных о нежелательных эффектах, переносимости, иммуногенности или долгосрочных рисках. Все нижеизложенное выводится из предклинических исследований и фармакологии пептидов.
- warningПоскольку это введённый чужеродный пептид, возможные парентеральные эффекты включают раздражение места введения, покраснение или отек, а также теоретический риск иммунного/анти-лекарственного ответа при повторном применении — ничего из этого не было формально характеризовано для B7-33.
- warningЕго крайне короткое in vitro время полураспада (~6 минут) означает, что однократная подкожная инъекция обеспечивает лишь кратковременное воздействие; исходные исследования использовали непрерывную осмотическую минипумпу, поэтому простая инъекция может не воспроизвести — и может непредсказуемым образом изменить — эффекты, зарегистрированные у животных [3][5].
- warningB7-33 сохраняет вазопротекторную, вазорелаксантную активность в сосудах грызунов [2]; по аналогии с релаксином, возможно, будут наблюдаться эффекты на артериальное давление или гемодинамику, хотя у человека нет данных о сердечно-сосудистой системе.
- warningКак агонист RXFP1, активный в репродуктивных и сосудистых тканях, использование в беременности, у людей, пытающихся забеременеть, или при сердечно-сосудистых заболеваниях нельзя считать безопасным; сигнализация семейства релаксина не была проверена на безопасность в этих условиях с этим веществом.
- warningНет данных о взаимодействии препаратов. Комбинирование B7-33 с антифиброзными средствами, агентами, модулирующими RAAS (например, ингибиторами АПФ), или другими вазоактивными соединениями полностью не изучено и должно рассматриваться как экспериментальное.
- warningЧистота и идентичность исследовательских материалов варьируется в зависимости от поставщика; нестабильный линейный пептид склонен к деградации и агрегации, поэтому загрязнители и продукты деградации представляют реальную практическую опасность.
- warningРегуляторный/исследовательский статус: B7-33 не одобрен FDA, EMA или любой другой регулирующей организацией, не является лекарственным средством или пищевой добавкой и продается только для in vitro/лабораторных исследований. Эта страница образовательная и не является медицинским советом или одобрением применения у человека.
Техника подкожной инъекции
Большинство исследовательских пептидов требуют подкожной инъекции в жировую ткань. Никогда не вводите непосредственно в кровеносный сосуд или глубокую мышечную ткань, если это не указано клинически.
1. Выбор места
Обычные места введения — живот (2 дюйма от пупка), наружная верхняя часть руки или бедра.
2. Дезинфекция
Тщательно очистите выбранную область, пробку и верхнюю часть флакона с помощью тампонов с 70% изопропиловым спиртом.
3. Угол и введение
Надавите на кожу и введите иглу под углом 45–90 градусов. Плавно нажмите на поршень.
4. Чередование мест
Постоянно меняйте места инъекций, чтобы избежать липодистрофии или рубцов в тканях.
Часто задаваемые вопросы
Какова типичная доза B7-33?expand_more
Не существует установленной дозы B7-33 для человека — он никогда не применялся у людей в клинических испытаниях, поэтому безопасная или эффективная доза для человека отсутствует. Наиболее часто цитируемая предклиническая цифра составляет около 0,25 мг/кг в день подкожно у мышей; после инфаркта миокарда в одном исследовании использовали 0,25 мг/кг подкожно при реоперфузии, а затем дважды в день, и в связанной модели сердечной недостаточности использовали 0,5 мг/кг в день у крыс. В этих исследованиях пептид обычно вводили непрерывным осмотическим минипомпом, а не однократной инъекцией. Микрограммы на инъекцию, указанные на этой странице (примерно 250–1000 мкг), являются только образовательной справочной величиной, а не рекомендованной протоколом для человека.
Одобрен ли B7-33 FDA?expand_more
Нет. B7-33 не одобрен FDA, EMA или любой другой регулирующей организацией для любого применения. Это не лекарство, не пищевая добавка, и никогда не проходил клинические испытания у людей. Он существует только как исследовательское соединение (CAS 1818415-56-3), продаваемое для лабораторных, in vitro и предклинических исследований на животных. Любое применение у человека будет неодобрено и не изучено, и эта страница предоставлена исключительно в образовательных целях, а не как медицинская рекомендация.
Какова период полураспада B7-33?expand_more
Измеренное in vitro время полураспада B7-33 составляет всего около 6 минут, потому что это незащищенный линейный пептид, быстро разрушаемый протеазами сыворотки; его in vivo время полураспада ожидается еще короче, чем у естественного релаксина. Именно по этой причине исследователи обычно вводят его непрерывно с помощью осмотических минипомп. Работа по медико-химическому модифицированию липидированной версии (L-B7-33) увеличила in vitro время полураспада примерно в десять раз до около 60 минут, сохранив активность RXFP1, но этот улучшенный аналог все еще остается чисто экспериментальным.
Как B7-33 восстанавливается для исследований?expand_more
В образовательной модели подкожного введения, используемой здесь, 5-мг флакон восстанавливается 2,0 мл бактериостатического раствора воды, чтобы получить 2,5 мг/мл (25 мкг на единицу инсулинового шприца). Добавьте воду медленно по стенке флакона, аккуратно помешивайте, не встряхивайте, и подождите, пока раствор станет прозрачным. Поскольку B7-33 нестабилен в растворе, храните его в холодильнике и используйте в течение примерно 1–2 недель, или разделите на аликвоты и заморозьте при -20 °C. На этом уровне концентрация 250 мкг составляет 10 единиц, 500 мкг — 20 единиц, а 1000 мкг — 40 единиц на шприце U-100.
В чем разница между B7-33, релаксином или серелаксином, и можно ли комбинировать их?expand_more
B7-33 — это фрагмент цепи B релаксина-2, действующий как смещенный агонист RXFP1: он предпочитает антифибротический путь pERK1/2–MMP и в основном пропускает cAMP-сигнализацию полноразмерного релаксина/серелаксина, и в экспериментах у животных он не стимулировал рост опухолей, как это может делать релаксин. Он также значительно дешевле в синтезе, чем двухцепочечный серелаксин. Нет проверенных протоколов комбинирования — нет данных о комбинации B7-33 с другими пептидами или лекарствами у людей, и взаимодействие с противофиброзными или кардиоваскулярными препаратами полностью не изучено, поэтому любые комбинации следует рассматривать как чисто экспериментальные.
Связанные руководства и инструменты
Пошаговые ссылки по реconstituting, измерению и хранению B7-33, а также универсальный калькулятор дозировки.
МЕДИЦИНСКОЕ ОТКАЗОВАНИЕ:Образовательные научные руководства только. Лиофилизированные пептиды — это экспериментальные химические соединения и НЕ одобрены для употребления человеком, диагностики или терапии. Проконсультируйтесь с лицензированным врачом перед любым исследовательским применением.
Академические ссылки и цитирования исследований
Hossain MA, Kocan M, Yao ST, Royce SG, Nair VB, Siwek C, Patil NA, Harrison IP, Rosengren KJ, Selemidis S, Summers RJ, Wade JD, Bathgate RAD, Samuel CS. Одноцепочечный производный гормон релаксина является функционально избирательным агонистом G-белкового связанного рецептора RXFP1. Chem Sci. 2016;7(6):3805-3819. Просмотр научной статьи →
Marshall SA, O'Sullivan K, Ng HH, Bathgate RAD, Parry LJ, Hossain MA, Leo CH. B7-33 воспроизводит сосудозащитные функции человеческого релаксина-2 (серелаксина). Eur J Pharmacol. 2017 Jul 15;807:190-197. Просмотр научной статьи →
Devarakonda T, et al. B7-33, функционально избирательный агонист рецептора релаксина 1, уменьшает неблагоприятную ремоделирование сердца, связанное с инфарктом миокарда у мышей. J Am Heart Assoc. 2020;9(8):e015748. Просмотр научной статьи →
Alam F, Gaspari TA, Kemp-Harper BK, et al. Одноцепочечный миметик релаксина, B7-33, сохраняет кардиопротекторные эффекты релаксина и быстрее уменьшает левожелудочковую фиброз по сравнению с периндоприлом в экспериментальной модели кардиомиопатии. Biomed Pharmacother. 2023 Apr;160:114370. Просмотр научной статьи →
Praveen P, Wang C, Handley TNG, Wu H, Samuel CS, Bathgate RAD, Hossain MA. Липидированный одноцепочечный производный релаксина демонстрирует улучшенную in vitro стабильность сыворотки без изменения активности. Int J Mol Sci. 2023;24(7):6616. Просмотр научной статьи →
Praveen P, et al. Одноцепочечные пептидные агонисты рецепторов релаксина. Mol Cell Endocrinol. 2019;487:34-39. Просмотр научной статьи →
Handley TNG, Praveen P, Tailhades J, Wu H, Bathgate RAD, Hossain MA. Дальнейшие разработки в направлении минимального активного производного человеческого релаксина-2. Int J Mol Sci. 2023 Aug 11;24(16):12670. Просмотр научной статьи →